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SEM掃描電鏡5種常用的生物樣品干燥方法介紹

日期:2024-07-29 11:24:17 瀏覽次數:67

掃描電鏡在觀察生物樣品時,要求樣品B須干燥,以避免在高真空環境中產生劇烈汽化,影響真空度、污染樣品或破壞樣品的微細結構。以下是五種常用的生物樣品干燥方法介紹:

1. 自然干燥法

基本描述:
自然干燥法是指樣品中的水分在大氣中自然蒸發,或樣品經脫水處理后脫水劑自然揮發而干燥的方法。這種方法適用于含水量較少、不易變形的樣品,如干種子、果殼、某些干花粉、長期保存的昆蟲針插標本等。

優缺點:

優點:簡便易行,無需特殊設備,成本較低。

缺點:干燥速度較慢,且對于含水量較多的動植物組織、游離細胞等樣品,自然干燥過程中表面張力可能導致樣品變形。

臺式掃描電鏡ZEM15.jpg

2. 烘干干燥法

基本描述:
烘干干燥法是將樣品置于烘干箱中,通過控制溫度和時間來去除樣品中的水分。一般溫度控制在80℃以下,烘干程度以含水量在5%以下為好。

優缺點:

優點:干燥速度較快,適用于不易變形且耐熱的樣品,如淀粉粒、孢子粉等。

缺點:高溫可能導致部分樣品成分損失或變形,不適用于熱敏性樣品。

3. 臨界點干燥法

基本描述:
臨界點干燥法是利用物質在臨界狀態時,液體和氣體的密度相等,氣液界面完全消失,液體的表面張力系數為零的特性,使樣品的液體完全汽化并以氣體方式排掉,從而達到完全干燥的目的。這種方法需要特殊設備——臨界點干燥儀。

優缺點:

優點:能較好地保存樣品的微細結構,減少干燥引起的變形。

缺點:設備昂貴,操作復雜,且仍存在一定的變形風險(約5%)。

4. 冷凍干燥法

基本描述:
冷凍干燥法是將含水樣品放入低溫環境中冷凍,然后使用真空技術使樣品中的水分直接由冰升華成水蒸氣,從而達到干燥的目的。這種方法避免了水分在液態時表面張力對樣品的損傷。

優缺點:

優點:無需脫水處理,減少了樣品變形的風險;適用于含水量高、熱敏性強的樣品。

缺點:設備復雜,操作時間長,且易產生冰晶損傷(特別是在直接冷凍干燥時)。

5. 真空干燥法

基本描述:
真空干燥法是將經脫水的樣品置于真空容器中進行干燥。常用的真空干燥法包括以叔丁醇為升華介質的叔丁醇干燥法等。這種方法結合了冷凍干燥和真空技術的優點,既保留了冷凍干燥法的優點,又避免了冷凍處理可能帶來的損傷。

優缺點:

優點:干燥速度快,對樣品損傷小,適用于多種生物樣品。

缺點:需要特殊設備,且有機溶劑可能對樣品成分有抽提作用。

總結

在選擇生物樣品干燥方法時,應根據樣品的特性(如含水量、熱敏性、微細結構等)、觀察要求和設備條件來綜合考慮。對于大多數生物樣品而言,臨界點干燥法和冷凍干燥法因其能較好地保存樣品微細結構和減少變形風險而被廣泛應用。然而,這兩種方法也存在一定的局限性,如設備昂貴、操作復雜等。因此,在實際應用中應根據具體情況靈活選擇。